Макроекономічні показники України
2013 рік
• Зростання ВВП: -0.8%
• Інфляція: 0.5%
• Безробіття: 8.0%
2012 рік
• Зростання ВВП: 0.2%
• Інфляція: -0.2%
• Безробіття: 8.1%
2011 рік
• Зростання ВВП: 5.2%
• Інфляція: 4.6%
• Безробіття: 8.6%
Зворотній зв'язок
Замовити
загрузка...

Головна:Фармакогностическое вивчення роду хвощ

ЗМІСТ |Запровадження | | |Огляд літератури | | |Глава I 1.1 Ботанічна характеристика роду хвощ, його | | |хімічний склад, перспективність створення лікарських | | |препаратів | | |1.1.1 Ботанічне опис | | |1.1.2 Анатомічне будова (мікроскопія) | | |1.1.3 Географічне поширення | | |1.1.4 Щодо хімічного складу рослин роду хвощ | | |1.1.5 Застосування роду хвощ у народній і официнальной медицині | | |1.2 Нові протигрибкові препарати | | |Укладання | | |Глава II Матеріали, методи лікування й апаратура | | |Глава III Перспективність використання роду хвоща до створення| | |лікарських засобів | | |3.1 Перспективність використання роду хвоща до створення | | |лікарських засобів | | |3.2 Біологічна активність і перспективність деяких таксонов| | |до створення лікарських засобів | | |Глава IV Вивчення хімічного складу роду хвощ | | |4.1 Якісний склад | | |4.2 Кількісне визначення | | |4.3 Товароведческие показники | | |Глава V Розробка технологічного процесу набуття сухого | | |екстракту | | |Висновки | | |Літературний огляд | |

ВВЕДЕНИЕ

АКТУАЛЬНІСТЬ ТЕМИ: Проблема створення нових лікарських засобів рослинного походження - одне з актуальних у сучасній фармації . Це завдання може бути розв'язана рахунок підвищення якості існують і впроваджених нових лікарських средств.

Кількість рослин , використовуваних як лікарських дуже велике. Але тільки незначну частину з них , найважливіших й частіше застосовуваних, визнана официнальной і у сучасну фармакопею.

Дикорастущим лікарським рослинам великий інтерес приділяється завдяки великим зонам проростання, і, отже, що дозволяє забезпечити потреби охорони здоров'я на лікарському сырье.

Для лікування дерматологічних захворювань поруч із гормонами, антибіотиками і синтетичними продуктами нині успіхом користуються препарати, отримані з лікарського рослинного сировини, перевагу яких у широті фармакологічного дії, малої токсичності, можливості тривалого застосування без побічних эффектов.

Хвощ, користується підвищеним увагою дослідників та клініцистів наявністю цінних цілющих властивостей, достатніх площ проростання, отже сировинної базы.

Поруч із відзначається неповне вивчення фармакологічного дії хвоща , його лікарських форм і методів оцінки, що зумовило передумови ще поглибленого вивчення хвоща як лікарського средства.

Великий ареал проростання дозволяє вживати хвощ як сировини для промислового виробництва препаратов.

МЕТА РОБОТИ: Фармакогностическое вивчення , розробка технології екстракту хвоща сухого.

ОСНОВНІ ЗАВДАННЯ: 1. Визначити перспективний вид роду хвоща. 2. Вивчити антигрибковую активність роду хвощ. 3. Вивчити хімічний склад роду хвоща. 4. Розробка технологічного процесу сухого екстракту хвоща.

НАУКОВА НОВИЗНА: Вперше проведено фитохимический аналіз деяких видів роду хвощ, розроблена технологія одержання екстракту, визначено противогрибковая активность.

ПРАКТИЧНА ЗНАЧИМІСТЬ: Розроблено схему технологічного процесу отримання сухого екстракту хвоща полевого.

ОГЛЯД ЛИТЕРАТУРЫ

Глава I.

1 Ботанічна характеристика деяких видів роду хвощ, його хімічний склад, перспективність створення лікарських препаратов.

1.1.1Ботаническое опис .

Хвощ польовий (Eqisetum arvense L), сімейство хвощевые (Eqisetaceae)- це багаторічне трав'янисте споровое рослина з повзучим, глибоко зануреним, буровато-черным кореневищем, нерідко несучим кулевидні бульби. Стебла двоякого роду: спороносные, з'являються навесні, і літні - безплідні, залишаються до осени.

Спороносные пагони не гіллясті, соковиті, заввишки 7-25 див, світло бурі з гладенькими ребрами і колокольчатыми бурими влагалищами, закінчуються спороносным колоском. Колосся овально-цилиндрические, суперечки кулевидні зеленкуваті. Після осипання суперечка спороносные стебла швидко відмирають, і з цього ж кореневища відростають літні вегетативні пагони. Літні пагони прямостоячие, бороздчатые, заввишки до 50-60 див, без колосків, зелені, тонкі, членисті, жорсткі з численними гілками, всередині порожнисті. Гілки безлистные, в мутовках по 6-8, косо вгору спрямовані, прості, чотирьох-, пятигранные. Піхви стебел, які становлять редуковані листя, циліндричні, 4-8мм довжини, з треугольно-ланцетными, черно-бурыми, белоокаймленными зубцями, зазвичай поєднані між собою по 2-3, піхви гілочок зелені з 4-5 буроватыми, длиннооттянутыми зубчиками [ ] .

Складний зовнішній вигляд мають значення і решта видів хвощів, що дуже утрудняє встановлення подлинности.

Хвощ луговий (Eqisetum pratense L). Багаторічне , споровое, трав'янисте рослина з нетолстым, повзучим чорним кореневищем без клубеньков. Спороносные стебла 10-20 див заввишки, блідо-зелені, прості, гладкі, по дозрівання суперечка розвивають зелені галузі і стають подібними з вегетативними утечами. Піхви ними трохи більше 1,5 див довжиною, узкоколокольчатые. Колос 0,8-1,5см довжиною, цилиндрический.

Хвощ лісової (Eqisetum sylvaticum L). Багаторічне, споровое, трав'янисте рослина з тонким, повзучим, черно-бурым, гіллястим кореневищем. Спороносные стебла 20-40 див заввишки, до 0,5см в діаметрі, рудуваті чи червонуваті, прості з гладенькими ребрами. Піхви ними дуже великі, 1.5-3см довжиною, 1см шириною, у нижній частині зелені, у верхній бурі, перетинчасті, серед 6-10. Колосся 2-4см довжиною, циліндричні. Після дозрівання суперечка генеративні пагони зеленіють і розвивають мутовки багаторазово гіллястих гілок. Безплідні стебла с10-14 ребрами. Піхви 6-12см довжиною, колокольчатые, блідо-зелені, з ржаво-коричневыми лопатями. Гілки численні, 3-5-гранные, тонкі, з'являються з 4-5 вузла.[ ].

Хвощ болотний (Eqisetum palustre L). Болотяне, гидрофильное рослина. Кореневища матово-черное, розгалужене, з клубеньками. Стебла 15-40 див заввишки, 1.5-3 мм діаметром, зелені, зазвичай гіллясті чи прості, з тонко поперечно-морщинистыми крилатими ребрами. Піхви 5-12мм довжиною, узкоколокольчатые, зелені чи темні, зубці серед 5-8, коротше піхв, чорно-коричневі, з широкої білої каймою. Гілки вгору спрямовані, колос 1- 3см довжиною, циліндричний, тупий, на короткій ніжці.[ ].

Хвощ зимівля (Eqisetum hiemale L). Кореневища майже чорне, вертикально розгалужене. Стебла 50-80 див заввишки, 3-5мм діаметром, циліндричні, міцні, жорсткі, з широкою внутрішньої порожниною. Ребра численні, тонкі. Піхви 5-10мм довжиною, блідо зелені, нагорі і за підставі чорні, з 10-30 шиловидными зубцями, які рано обламуються. Колос 1-3 див довжиною, овальний, вгорі загострений.[ ].

1.1.2 Анатомічне будова (микроскопия)

Поперечні зрізи междоузлий стебла різних видів хвоща округлі і, за більш-менш виступаючими ребрами і вдавленными борозенками стебла. Центр стебла зазвичай порожній і серцевина відсутня; які перебувають навколо центральної порожнини однорядный пояс які проводять пучків відмежований эндодермой від корковой частини. У корковой частини стебла під эпидермисом розташовується колленхима суцільним чи перерваним кільцем; найбільше вона розвинена у виступах. За колленхимой слід хлорофилоносная паренхіма, яка найбільше розвинена під борозенками, несучими устячка. У таких паренхимных ділянках утворюються, шляхом розбіжності клітин чи розриву, великі воздухоносные порожнини. Проти виступів ребер розташовуються проводять пучки. До периферії від пучковой порожнини розташована флоема. Центр стебла зайнятий великої воздухоносной полостью.

Устячка мають надзвичайно своєрідне будова, притаманне всіх видів хвоща. Супроводжують клітини їх обладнані внутрішній своєї поверхні ребрами, виступаючими в порожнину клітини. На поверхневих препаратах видно ці ребра, променисто які суперечать навколо устьичной щілини. По розташуванню устьиц розрізняють два типу: тільки в видів супроводжують клітини розташовані на півметровій рівні, і у площині клітин епідермісу, в інших - вони завантажені. При занурених устьицах велике поглиблення над що супроводжують клітинами частково перекрито виступаючим окременевшем краєм зовнішніх стінок сусідніх епідермальних клітин, залишають лише посередині неправильне отвір. Так утворюється велика воздухоносная порожнину над устьицем, отвір якої може і видно насамперед на поверхневих препаратах.

Види хвоща добре відрізнити між собою по контуру стебла, будовою паренхіми, эндодерме і типу устьиц.

1.1.3 Географічне распространение

Хвощ польовий має космополітичний тип ареалу. Це найбільш поширений вид хвоща, що росте майже з скрізь, крім пустель, напівпустель, і навіть Крайньої Півночі. Південний кордон хвоща залежить від Каспійського морів до Азовського, звідки повертає Схід, перетинає Волгу у Волгограда й річку Урал і геть межі країни [ ].

Хвощ польовий зростає на луках, в ялинових, светлохвойных, липових, соснових, сосново-березовых, березових і змішаних лісах. Воліє заплавні місця, берега річок, чагарникові зарості, узбіччя доріг, відкоси залізничних насипів, піщані і глинисті кар'єри. Нерідко утворює на приречных мулистих пісках майже чисті зарості. Часто є у озимих та ярих посівах і є трудноискоренимым корневищным бур'яном, вважається індикатором кислих грунтів [ ].

Хвощ болотний найпоширеніший на трав'янистих і мохових болотах, луках, заростях прибережних чагарників, по задерненным кам'яним розсипам і покладам, лісосмузі, в Європейській частині заходить й у а Арктику, де знайдено по північному узбережжю Кольського півострова, на Канине і Колгуеве, через Большеземельную тундру сягає Полярного Уралу. У арктичною Сибіру відсутня, і тільки крайньому сході знайдений за Анадиру. На південь вид поширений до у Чорному морі; поширений з усього Кавказу. Відсутня в нижньому Поволжі та у Криму; захоплює Сибір й усе Далекий Схід [ ].

Хвощ лісової поширений у лісах, заростях чагарників, на лісових і субальпийских луках, кочкарных болотах.

Хвощ луговий є у Західного Сибіру, Тюменської області, в Хакасской автономної області, Курганської області, Омській, Новосибірській, Кемеровської областях. Частіше є у лісах, серед чагарникових заростей, на кам'янистих россыпях.

Хвощ зимівля росте у лісах, серед заплавних чагарників, на лісових луках, стрімчастих берегах річок, ручьев.

Хвощі можна натрапити у різних рослинних зони і співтовариствах, але у будь-якому разі біля води чи місцях із достатньою змістом вологи у грунті чи з відносно не глибоким заляганням грунтових вод.

Входячи у складі піонерних рослинних угруповань і захоплюючи території з порушеним природним рослинним покривом, хвощі нерідко утворюють чисті чи вводити майже чисті зарості там, де інші рослини що неспроможні жити, наприклад, через надлишок води чи, навпроти з-за її браку тих шарах грунту, де міститься коренева система цих рослин. Якщо поселившись б на будь-якій території, хвощі завдяки наявності глибоко залягаючих кореневищ, успішно протистоять таким несприятливих генотоксичних впливів довкілля, як посухи, лісові пожежі і т.п. й успішно конкурують із іншими рослинами, довго утримуючи захоплену територію. Поселяясь на місцях з порушеним рослинним покровом.

1.1.4 Щодо хімічного складу рослин роду хвощ

Перші праці з дослідження хімічного складу рослин сімейства хвощевых з'явилося в 40-ві роки ХХ століття. Ранні роботи носили розрізнений характері і стосувалися виділення, тож вивчення лише окремих сполук (сапонинов, алкалоїдів, флавоноїдів) [ ].

Нахамура і Хукути (1940) виділили з хвоща польового флавоноїди эквизетрин, изокверцетин і 5-гликозид лютеонина [ ]. Пізніше Харборн (1967) і Салех (1972) одержав із сировини хвоща польового флавоноидные сполуки, похідні кемпферола і кверцетина [ ].

Ці самі сполуки були ідентифіковані чеськими вченими (1980) методом тонкослойной хроматографії і визначено їх кількісний вміст. Порівняльне дослідження хімічного складу польських видів хвоща також показало присутність флавоноїдів і фенолкарбоновых кислот переважають у всіх видах.

У нашій країні, внаслідок хімічного дослідження свіжої трави хвоща польового та її спороносных стебел, Сырчиной А.І. встановлено наявність 26 фенольних сполук, до складу яких входять флавоноїди, фенолокислоты, і похідні 1-инданона. Флавоноидные сполуки хвоща польового представлені: флавононами (нарингенин), флавонолами (аромодендрин, таксифолин, кемпферол, кверцетин), флавонами (генхванин, лютеолин, апигенин, 6-хлорапигенин)[ ].

Цим самим автором методом газожидкостной хроматографії в хвоще польовому идентифицированны оксибензойные і оксикоричные кислоти: п-оксибензойная, протокатеховая, ванилиновая, галловая, п-кумаровая, феруловая, кавова[ ].

Вивчаючи рослини роду Eqisetum, з хвоща польового виділили сапонін - эквизетонин (до 5%), розщеплюваний при гідролізі на агликон - эквизетогенин і фруктозу [ ].

Виявлено водорозчинні кислоти: аконитовая, арабиноновая, цитринова, фумаровая, глюконовая, малоновая, фосфорна, хінна, треоновая.

Хвощ польовий є рекордсменом серед рослин за змістом кремнію. Так було в сухому речовині хвоща польового міститься 9% кремнезему, а попелі до 96%. У соку хвоща польового кремній виявлено в розчинній формі кремнієвої кислоти, що з органічними сполуками. Зі збільшенням рослини зміст кремнію зростає, досягаючи максимуму наприкінці вегетації. Також у хвоще знайдено особливі ферменти - силиказы, які б перетворенню неорганічних сполук кремнію в органічні [ ].

Щодо хімічного складу алкалоїдів рослин сімейства хвощевых представлено роботах До. Эугстера, Губанова І.А., Баньковского А.І. та інших. Хвощ польовий містить у вегетативних органах небагато (до 0,26%) алкалоїдів (нікотин, 3-метоксипиридин і палюстрин), є загальним всім видів хвощів [ ].

Також у траві хвоща польового виявлено гіркоти, дубильні речовини, смоли, 30-190мг% аскорбінової кислоти, 4.7мг% каротину, вітаміни групи У [ ].

1.1.5 Застосування роду хвоща у народній і официнальной медицине

Препарати хвоща польового (настої і відвари) призначають як сечогінного кошти за застійних явищах серцевого походження (пороки серця, серцева недостатність), і навіть при набряках , пов'язаних з легеневої недостатністю, при плевритах, з велику кількість эксудата [ ].

При захворюваннях сечовивідних колій та сечового міхура (пиелиты, цистити, уретрити), хвощ польовий використовується разом з толокнянкой чи іншими рослинами, з мочегонными і протизапальними властивостями [ ]. При нефриті і пиелонефрите застосування препарату протипоказано, оскільки вони можуть викликати роздратування нирок [ ].

Широко використовують траву хвоща польового при гемороїдальних, маткових, шлункових та інших кровотечах [ ].

Настій трави хвоща польового застосовується при водянці, туберкульозі легких, кишкові інфекції, кривавому поносі, видалення каміння із нирок, при головний біль, аддисоновой хвороби, запалення сідничного нерва, при ревматизмі і подагре.

З огляду на здатність хвоща прискорювати виведення свинцю з організму, його рекомендують при гострому і хронічне отруєння свинцом.

Трава хвоща польового входить до складу противоастматической мікстури по прописи Тарсакова, пасти ‘’Фітолізин’’, противодиабетического збору ‘’Арфазетин’’[ ].

Застосовують хвощ й у догляду за шкірою особи. При жирною і пористої шкірі серветки, змочені настоєм, накладають в наявності. Настій трави хвоща польового входить до складу косметичних кремів ‘’СОТ’’ і ‘’Аленушка’’.

Також хвощ застосовується як противозудное на лікування алергічних дерматитів [ ].

У народній медицині застосовується як хвощ польовий, а й інші види хвоща.

Хвощ зимівля використовують як сечогінний, в'язке, кровоспинне, болезаспокійлива, седативне, потогінне засіб; застосовується при туберкульозі легких, при ревматизмі, головний біль, при жовтяниці, грижі, на лікування виразок, пухлин, воспалений.

Хвощ лісової теж використовують як в'язке і сечогінний средство.

1.2 Нові протигрибкові препараты.

Інфекційні захворювання людини, що викликаються грибками, носять загальне назва мікози. Етіологія, патогенез і клінічна картина мікозів надзвичайно різноманітні, проте вона практично завжди цих захворювань у патологічний коло втягується кожа.

Переважна більшість патогенних і умовно патогенних грибів викликають захворювання лише за наявності чинників, знижують нормальну фізіологічну захисну функцію шкіри що порушують резистентність організму проти інфекції (особливо в иммунодефицитных станах). Кількість цих причин останнім часом різко зросла (несприятливі екологічні чинники, збільшення кількості хворих із злоякісними хворобами, особливо імунної системи, широке використання медичних препаратів які мають иммуносупрессивными властивостями: цитостатиков, гормонів, антибіотиків і т.д.)

Амиказол (Amycozolum)- 5% мазь і 2-5% пудра. Активним в отнашении дерматофитов і дрожеподобных грибків роду Candida.

Амфоглюкамин (Amphoglucaminum)- застосовується при локалізованих і глибоких микозах.

Анкотил (Ancotil)- випускається у вигляді пігулки (0,5) і розчину для инфузий. Свідчення: системний кандидоз, криптококкоз і хромобластомикоз; аспергиллез.

Антифунгол (Antifungol)- активну речовину клотрімазол. Випускається в формі мазі, вагінального крему і вагинальных таблеток.

Батрафен (Batrafen)- випускається у вигляді крему, розчину і пудри для зовнішнього застосування, лаку для нігтів і вагінального крема.

Гино-дактарин (Gino-dactarin)- вагінальні свічки по 0,1 р. Застосування: місцеве лікування вагинальных кандидозов і суперинфекции, викликаних грамположительными микроорганизмами.

Гино- травоген (Gino-travogen)- кульки вагінальні по 0,6 р. Свідчення: грибкові інфекції влагалища.

Дактозин (Daktozin)- комбінований препарат, випускається у вигляді мазі. Оснавное показання- лікування «пеленочного» кандидоза у детей.

Дифлюкан (Diflucan)- желатинові капсули по 0.05; 0.1; 0.15; 0.2; і розчин для инфузий. Застосовується під час лікування різних кандидозов і за профілактиці грибкових інфекцій в хворих зі злоякісними захворюваннями, які схильні до таких інфекцій внаслідок хіміотерапії цитостатиками.

Ламізил (Lamisil)- протигрибковий препарат для перорального і місцевого застосування. Препарат має широкий спектр противогрибкового действия.

Лоцерил (Loceril)- лак для нігтів- 5% по 5 мл, упаковка містить також 60 тампонів, змочених 70% изопропиловым спиртом в пакетиках з фольги, 10 лопаточек, 30 пилянь для нігтів. Крем 0,25% по 20 р в тубах. Застосування: мікози нігтів, стоп, гладкою кожи.

Низорал (Nizoral)- таблетки, крем, шампунь. Свідчення: грибкові інфекції шкіри, волосся, нігтів, статевих органов.

Орунгал (Orungal)- капсули по 0,1 р. Свідчення: захворювання шкіри слизових оболонок, викликані чутливими до препарату грибами: кандидозный вульвовагинит, отрубевидный лишай, мікози, викликані дерматофитами .

Толмицен (Tolmicen)- 1% паста,1% лосьйон, 0,5% порошок. Свідчення: мікози гладкою шкіри, складок, стоп, отрубевидный лишай.

Эконазол (Econasol)- крем 1%, лосьйон 1% для зовнішнього застосування, аерозоль 1% для місцевого застосування. Володіє широкий спектр действия.

Заключение

Рослини роду хвощ - поширена багаторічне дикорастущее трав'янисте рослина, здавна які використовуються як у народній і у официнальной медицине.

Виділено і вивчені основні біологічні активні речовини трави хвоща польового: фенольные сполуки, органічні сполуки кремнію і сапонины.

Широке використання коштів у основі біологічно-активних речовин хвоща у народній медицині спонукало нас вивчити її решта видів активності, чому присвячена експериментальна частина работы.

Глава II. Матеріали, методи лікування й аппаратура

1. Об'єктом вивчення служила надземна частина (трава) хвоща, зібрана цього літа в 1996-1998 р. біля Томській області, сушіння сировини воздушно-теневая.

2. Як извлекателей і при отриманні екстрактів використовувалися: вода очищена, етанол 70%,40%, 20%, хлороформ, ацетон. 2. Для хроматографії застосовували папір хроматографическую Ленінградську марки «М» у системі ацетон:бутанол:вода (7:2:1). 3. Апаратура: 1 Спектрофотометр «Спектроскан»; 2 Сикатив шафу; 3 Термостат ТС-80 МУ42; 4 Перколяторы лабораторні. 5. Якісний аналіз змісту різних груп природних соединений.

5.1 Виявлення алкалоидов.

Для виявлення алкалоїдів в досліджуваному рослинному сировину, готували кисле вилучення: 5,0 р сировини заливали 50мл 1% розчином хлорноводородной кислоти і залишали проти ночі. Вилучення фільтрували і визначали у ньому алкалоїди з допомогою общеосадительных реактивов:

1. реактив Драгендорфа;

2. реактив Фреде;

3. реактив Вагнера;

4. 1% розчин пікринової кислоты;

5. 1% розчин кремниево-вольфрамовая кислота;

6. 1% розчин фосфорно-вольфрамовой кислоты;

7. 1% розчин фосфорно-молибденовой кислоты.

2. Виявлення флавоноидов.

Для якісного виявлення флавоноїдів проводили цианидиновую пробу (проба Синода).

1,0 р сировини заливались 10 мл 96% етанолу та нагрівалися на водяній бані до кипіння. Колба струшувалася кілька разів, зачинялися корком і оставлялась на 3-4 години. Спиртове вилучення зливали і концентрували до 2-х мл, щодо нього додавали 5-7 крапель концентрованої хлорноводородной кислоти і десяти мг металевого цинка.

3 Виявлення дубильних веществ

Приготування вилучення: 1 р подрібненого рослинного сировини заливали 100 мл води. Нагрівали на водяній бані 20-30 хв, проціджували через вату й отримане вилучення використовували щодо якісних реакций.

1 До 2-3 мл вилучення додавали кілька крапель розчину железоаммониевых квасцов у разі гидролизуемых дубильних речовин з'являється чорно-синє забарвлення чи осад, а конденсованих- чорно-зелене забарвлення чи осадок.

2 До 1 мл вилучення додавали 2 мл розчину 10% оцтової кислоти і одну мл розчину 10% середньої солі ацетату свинцю. За наявності конденсованих дубильних речовин фільтрат офарбиться в чорно-зелений колір від поповнення 5 крапель 1%-ных железоаммониевых квасцов і 0,1 р ацетату свинца.

4 Виявлення сапонинов.

Приготування вилучення. Готували водний настій 1:10, нагріваючи подрібнене сировину на водяній бані протягом десяти хв. Настій після охолодження фільтрують та друзі проводять з нею реакции.

Реакція пенообразования. Беруть дві пробірки, до однієї доливають 5 мл 0,1 моль/л хлорноводородной кислоти, а іншу- 5мл 0,1моль/л гидроксида натрію. Потім у обидві пробірки додають по 2-3 краплі вилучення чи розчинів сапонинов і дуже розворушували. За наявності сировину тритерпеновых сапонинов на обох пробірках утворюється стійка пена.

5 Виявлення алифатических кислот.

1 Щавлева кислота.

До 2 мл водного вилучення додали 4 краплі розчину кальцію сульфату насиченого, внаслідок повинен утворитися осад розчинну в соляної кислоті і розчинну в оцтової кислоте.

2 Бурштинова кислота.

До 1 мл вилучення додати кілька кристаликів резорцина, потім стінці пробірки додати 0,5 мл концентрованої сірчаної кислоти, остудити і додати 0,5 мл 10% розчину гидроксида амонію, має з'явитися зелена флуоресценция.

3 Цитринова кислота.

1 мл вилучення розмістити у выпарительную чашку, додати кілька кристаликів ваніліну і випарити насухо. До залишку додати 2-3 краплі конц. сірчаної кислоти, нагріти на водяній бані до появи фіолетового окрашивания.

4 Яблучна кислота.

До 2 мл екстракту додати 0,1 (-нафтола і 1каплю конц. сірчаної кислоти. Опустити пробірку на 1/2 хв в киплячу водяну лазню має з'явитися яскраво- жовта з зеленим флуоресценция.

5 Винна кислота.

4 краплі водного екстракту випарити насухо в порцелянової чашці, додати 1 мл конц. сірчаної кислоти та ще кількома кристаликами резорцина, нагріти на водяній бані до появи вишнево-червоного окрашивания.

6 Виявлення полисахаридов.

До 8,0 сировини додали 260 мл води, потім збовтувати протягом 1 години, залишили лише на добу на холоду, злили з сировини вилучення і профільтрували його. У фильтрате брали в облогу водорозчинні полісахариди ( попередньо упарив фільтрат до1/3) 2-х кратним обсягом 96% етанолу (фр.А).

Що Залишилося сировину обробили 100 мл киплячій водою очищеної із 0,4 до мл конц. хлорноводородной кислотою і 30 хв витримали на киплячою водяній бані. Потім у фильтрате брали в облогу пектинові речовини 2-х кратним обсягом 96% етанолу (фр. Б).

Сировину обробляли 10% розчином гидроксида натрію, залишали на добу, потім фільтрували й у фильтрате брали в облогу полісахариди 50% оцтової кислотою (фр. В).

Кожну фракцію окремішності отфильтровывали на воронку Бюхнера. Опади сушили за нормальної температури +90 (З до постійної массы.

Далі проводили кислотний гідроліз. Точну навішення (0,1) кожної фракції поміщали в ампули, додавали у кожну по 5 мл 10% розчину сірчаної кислоти. Ампули запаивали і нагрівали за нормальної температури +105(С протягом 3-х годин. Ампули прохолоджували і вміст кількісно переносили в мірну колбу на 25 мл, обсяг доводилим до мітки водою (розчин А).

10 мл гідролізату (розчину А) розбавити 5 мл води та нейтралізували порошком карбонату барію по універсальної індикаторної папері. Розчин фільтрували через паперовий фільтр, промивши водою. Отриманий фільтрат упаривали до обсягу 0,5 мл (розчин Б).

На хроматографическую папір Ленінградської фабрики марки «М» наносимо 0,02мл упаренного фільтрату і стандартні зразки цукрів, хроматографировали висхідним методом у системі ацетон:бутанол:вода (7:2:1).

Висушений хроматограмму обробляли анилинфитолатом і сушили в сушильній шафі за нормальної температури +105(С до появи пятен.

Нейтральні сахара:

- глюкоза Rf-0.15;

- галактоза Rf-0.12;

- арабиноза Rf-0.24;

- ксилоза Rf-0.27;

- рамноза Rf-0.4.

Приготування анилинфитолата:

0,93 сірчанокислого анилина

1,66 фталевої кислоты

100 мл водонасыщенного бутанола.

7 Виявлення кремния

Для ідентифікації сполук кремнію проводили качественую реакцію освіти жовтого і синього кремнемолибденового комплексу з молибдатом амонію у кислому середовищі. Як відновлювача використовували аскорбінову кислоту.

І тому 1,0 р подрібненого сировини спалювали в порцеляновому тиглі на електричної плитці і прокаливали в муфельній печі. Потім золу обробляли 1% розчином хлороводородной кислоти, фільтрували, осад на фільтрі промивали 1% розчином хлороводородной кислоти і розчиняли в розмірі 5% розчині гидроксида калію. З розчином силікату калію проводили реакцію з 10% подкисленным розчином молибдата амонію, приготовленого наступним чином: до 90 мл 11% розчину молибдата амонію додавали 10 мл 50 % розчину сірчаної кислоты.

До 1 мл отриманого розчину силікату калію додавали 2 мл 10% підкисленого розчину молибдата амонію, має утворитися жовте забарвлення, при додаванні кількох кристаликів аскорбінової кислоти жовта забарвлення повинна переходити в інтенсивно синій цвет.

8 Виявлення ефірних масел.

Використовувався метод перегонки водяникам пором. Навішення подрібненого сировини вміщують у широкогорлую круглодонную колбу місткістю 700-800 мл, доливають 300 мл води та закривають гумової корком зі зворотним холодильником. У пробці знизу зміцнюються металеві гачки, куди з допомогою тонкої дроту підвішують градуйований приймач так , щоб кінець холодильника перебував точно над воронкообразным розширенням приймача, не торкаючись його. Колбу зі змістом нагрівають до кипіння і найгірш кипятят.

Пари води та ефірної олії конденсуються не в холодильнику і рідина стікає до приймальника. Олія відстоюють в градуированном коліні приймача, а вода через менше коліно приймача випливає знову на колбу.

9 Виявлення сесквитерпеновых лактонов.

50 мл водного вилучення (1:10) поміщали в делительную вирву, додавали 10 мл хлороформу і обережно взбалтывали, потім хлороформное вилучення зливали в колбу. А до того водного вилучення додавали свіжу порцію хлороформу, друге вилучення об'єднували з цим. Потім хлороформ відганяли під тягою до отримання «смолки».

ИК-спектр знімали на спектрофотометре «Specord UR» з призмами Li F і NaCl в таблетках KBr заввишки 1 мм при співвідношенні речовин, наповнювача 1:400 й у пленке.

6. Кількісне визначення флавоноидов

Близько 1,0 р сировини поміщали в колбу з притертої корком на 50 мл, заливали 20 мл 90% етанолу із вмістом 2%-тов концентрованої хлороводородной кислоти, экстрагировали зі зворотним холодильником на киплячою водяній бані і декантировали в мірну колбу на 50 мл. Вилучення повторювали ще двічі, заливаючи по 10 мл 90% підкисленого етанолу. Об'єднане вилучення доводять до мітки 90% этанолом.

0,2 мл екстракту завдавали на смужку хроматографічної папери розміром 45(15 див і хроматографировали у системі 0,1 М хлороводородной кислоти. Хроматограмму висушували, в УФ-свете відзначали плями флавоноїдів, вирізали й элюировали 96% етанолом тричі по 10, 5 і п'яти мл в колбі спритертой корком зі зворотним холодильником на водяній бані. Отримане вилучення флавоноїдів зливали в мірну колбу на 25 мл, доводили до мітки 96% етанолом і знімали оптичну щільність элюятов з допомогою спектрофотометра з товщиною шару 1 див при довжині хвилі 353нм.

Суму флавоноїдів перераховували на кверцетин (Є =387,5) поформуле:

З= Д*У1*К*У2*100/(Е *I*М*(100-В)*У3,где

Д- оптична плотность

У1- обсяг першого вилучення, мл (50 мл)

У2- обсяг другого вилучення, мл (25мл)

У3- обсяг, який пішов на хроматографирование, мл (0,2 мл)

Є -питомий показник поглощения

М- маса навішення, г

У- вологість сировини, %

I- товщина шару, см

К-поправочный коефіцієнт на неповне элюирование з папери (1,15)

7. Кількісне визначення сполук кремния

У попередньо прожарений порцеляновий тигльпомещали близько 1,0 р сировини, спалювали і прокаливали в муфельній печі за нормальної температури не вище 560- 650 (З до постійної маси (3-5 часов).

Після охолодження золу кількісно переносили в склянку ємністю 150 мл, додавали 50 мл 5% розчину хлороводородной кислоти і нагрівали на киплячою водяній бані протягом 20 хв. Отриманий розчин отфильтровывали через вразливий беззольный фільтр, осад промивали 1% розчином хлороводородной кислоты.

Фільтр з осадом переносили в конічну колбу на 150 мл, додавали 50 мл 5% розчину гидроксида калію, потім прикривши годинниковим склом, нагрівали до кипіння і кмпятили протягом 20 хв (колбу перед нагріванням зважили). Після охолодження вміст колби доводили до початкової маси 5% розчином гидроксида калия.

1 мл отриманого фільтрату поміщали в мірну колбу на 25 мл, додавали 2 мл 5% розчину сірчаної кислоти, доводили водою до мітки. Через 15 хв визначали оптичну щільність з допомогою фотоэлектроколориметра в кюветі з завтовшки шару 10 мм при довжині хвилі 400 нм, використовуючи як розчину сравнеия фільтрат не додаючи реактивов.

8. Методика визначення экстрактивных веществ.

20 р сировини змаліли і просіювали крізь сито з отворами діаметром 1мм, поміщали в конічну колбу приплив розчинника до «дзеркала». Колбу закривали корком, зважували і залишали на 16 годин. Потім вміст старанно взбалтывали і фільтрували через сухий фільтр в суху колбу. Фільтрат переносили в порцелянову чашку діаметром 7-9 див, попередньо висушений при t( +100(C до постійної є і зважену на аналітичних терезах. Фільтрат випарюють на водяній бані насухо, і сушать при t( 100-105(С протягом 3 годин, прохолоджували в эксикаторе і взвешивали.

9. Визначення микроэлементного состава.

Для визначення мінерального складу трави хвоща використовувався рентгено- флуоресцентний метод.

У чашку (тигль) беруть навішення подрібненого продукту (проби зважують з похибкою трохи більше + 0,01 р), вміщують у сикатив шафу і висушують за нормальної температури близько +105(С.

Вміст чаші змочують 2-3 мл 32% розчином азотної кислоти і нагрівають на водяній бані до припинення виділення парів. Обробку азотної кислотою повторюють ще двічі. Потім чашу поміщають на електроплитку і проводять обвуглювання до припинення виділення диму, потім чашу переносять в електропіч за нормальної температури близько +250(С. Минерализацию проводять, поступово підвищуючи температуру електропечі на +50(С через кожні 30 мін та, довівши його до температури +450(С, продовжують минерализацию за цих умов до отримання золи. Чашу з золою беруть із електропечі, охолоджують до кімнатної температури і змочують золу 0,5-1,0 мл 32% розчином азотної кислоти. Потім кислоту насухо випарюють на електроплитці із слабким нагріванням і знову поміщають чашу з пробою в електропіч за нормальної температури, поступово доводячи температуру до 450(С і витримують 1 годину. Минерализацию вважають закінченою, коли зола стане білого чи злегка пофарбованого кольору, без обвуглених частинок. За наявності обвуглених частинок повторюють обробку золи розчином азотної кислоти чи водой.

У чашу з золою додають 10 мл 32% розчину азотної кислоти, нагрівають на електроплитці із слабким нагріванням до появи запахів азоту. Вміст чаші фільтрують в склянку через фільтр «біла стрічка». Старанно обполіскують чашу водою очищеної, фільтруючи змив чаші той самий склянку. У фільтрат, у якому важкі метали додають азотнокислий цирконил, нагрівають, фільтрують. Отриманий осад аналізують на приладі спектрометрі «Спектроскан».

10. Дослідження антигрибковой активности

З метою вивчення антигрибковых властивостей БАВ хвоща польового летюче- сухе сировину змаліли до розміру частинок 2-5 мм, заливали до «дзеркала» экстрагентом (вода очищена, етиловий спирт 70%, бутанол, хлороформ, ефір) наполягали протягом 16 годин, фільтрували й оприлюднювати отримані екстракти висушували в струмені повітря, нагрітого до +30(С.

Антигрибковые властивості отриманих екстрактів досліджували методом двукратных серійних розведень в рідкої середовищі Сабуро за методикою Вичкановой С.А.. Склад середовища Сабуро:

- 10,0 пептона,

- 40,0 мальтозы,

- води очищеної до 1 л.

Як тест-культуры використовували штами Aspergillus niger 163/3685, Candida albicans 4337, Trichophiton rubrum ВКПГ248/700, T. Mentagrophytes var. Interdigitale ВКПГ 268, Microsporum canis ВКПГ 326/316, отриманих у відповідному відділі мікології центрального кожно- венерологічного інституту МОЗ Росії р. Москва.

Підготовка грибов-дерматофитов до досвіду, посів та його облік проводили по методу Г.Н. Першина. Для посіву використовували суспензії зазвичай, добової агаровой культури дріжджів, культури цвілеподібного гриба 4-5 добові, інших дерматофитов 7-10 добові. Суспензії грибів готували в фізіологічному розчині по оптичного стандарту мутности.

Після додаткових розведень стандартного розчину мікробна навантаження патогенних грибів становила 1000 грибкових тіл один мл середовища. Посіви инкубировали в термостаті, дріжджі при 37(С, інші при 33(С.

Облік культури дріжджів проводили через 24 години, інші культури на 7-10 добу. Гранична доза препарату випробувана нами, відповідала 1000 мкг/мл. Повторність кожного досвіду 4-6 кратна. Контролем служили пробірки з сприятливим середовищем, засіяні аналогічним кількість тест-культуры, і навіть пробірки з середовищем і препарати без культури (для перевірки каламутності і осадження препарата).

За критерій антигрибковой активності препарату приймали фунгистатический титр, який оцінювали в микрограммах на 1 мл (мкг/мл) живильне середовище. За фунгистатический титр приймали граничну концентрацію препарату серед, коли він був відсутній видимий зростання культури у умовах оптимального темпиратуры і заданої мікробної нагрузки.

Глава III Перспективність використання роду хвоща щоб одержати лікарських препаратов

1 Перспективність використання роду хвоща щоб одержати лікарських препаратов.

Як у нашій країні настільки за кордоном відомо сечогінний дію хвоща польового. Нами провели вивчення різних літературних даних, і в декого з тих зустрічається інформацію про можливості використання хвоща польового в косметології і дерматології. У таблиці 1 представлені результати дослідження, у якій тоді як хвощем польовим наведено ще 43 виду лікарських рослин які ростуть біля Сибіру та що використовуються у косметології і дерматологии.

Tаблица 1

|Лікарські рослини |косм-е |дермат. |псоріаз/ |антимикр| | |ср-во |алергії |екзема |ср.-во | |1. Аніс звичайний | | |/+ | | |2. Береза бородавчатая |+ |+ | | | |3. Бузина чорна |+ |+ |/+ | | |4. Волошка синій |+ | | | | |5. Верба біла |+ | | | | |6. Вероніка лікарська |+ | |/+ | | |7. Тирлич крестовидная |+ | |+/ |+ | |8. Буркун лікарський |+ |+ | | | |9. Материнка звичайна |+ |+ | | | |10. Звіробою продырявленн. |+ |+ |/+ | | |11. Суниця лісова |+ | | | | |12. Календула лікарська |+ |+ | | | |13. Калина звичайна |+ | |+/+ |+ | |14. Крушина ламка |+ |+ | |+ | |15. Картопля |+ |+ | | | |16. Полуниця дика |+ | | | | |17. Кропива звичайна |+ |+ | | | |18. Листок Лопуха великий |+ | |+/+ |+ | |19. Цибулю ріпчаста |+ |+ | |+ | |20. Малина звичайна |+ |+ | |+ | |21. Морква звичайна |+ | |/+ |+ | |22. Медуниця лікарська |+ |+ |+/+ | | |23. Меліса лікарська |+ |+ | |+ | |24. Ялівець обыкн. |+ |+ | |+ | |25. М'ята перцева |+ | | |+ | |26. Обліпиха крушиновидная |+ |+ |+/ |+ | |27. Овес польовий |+ | | | | |28. Кульбаба лекарств-й |+ |+ | |+ | |29. Петрушка городня |+ |+ |+/+ | | |30. Подорожник великий |+ |+ | |+ | |31. Полынь гірка |+ |+ | |+ | |32. Родіола рожева |+ |+ |+/ | | |33. Шипшина коричний |+ |+ | | | |34. Ромашка аптечна |+ | | | | |35. Ряска мала |+ | |+/ |+ | |36. Сосна звичайна |+ |+ | | | |37. Деревій обыкн. |+ | | |+ | |38. Чемериця Лобеля |+ |+ | | | |39. Низка трехраздельная |+ |+ |+/ |+ | |40. Фіалка триколірна |+ |+ |/+ | | |41. Чебрець звичайний |+ |+ | | | |42. Чистотіл великий |+ | |+/ |+ | |43. Шавлія лікарський |+ |+ | |+ | |44. Хвощ польовий |+ |+ |+/+ |+ |

Із перелічених 44 видів лікарських рослин 43 виду використовують у косметології. Застосування в дерматології вивчалося за такою активності: антимікробне засіб, псоріаз, екзема, аллергодерматозы.

З таблиці 1 видно, що з лікування аллергодерматозов застосовуються 28 видів з 44 (береза бородавчатая, бузина чорна, буркун лікарський, материнка звичайна, звіробій продірявлений, календула лікарська, крушина ламка, картопля, кропива звичайна, цибулю ріпчаста, малина звичайна, медунка лікарська, меліса лікарська, ялівець звичайний, обліпиха крушиновидная, кульбаба лікарський, петрушка городня, подорожник великий, полин, родіола рожева, листок лопуха великий, сосна звичайна, чемериця Лобеля, низка трехраздельная, фіалка триколірна, чебрець звичайний, шавлія лікарський, хвощ полевой).

Для лікування псоріазу використовують 11 видів (тирлич крестовидная, калина звичайна, лопух, медунка лікарська, обліпиха крушиновидная, петрушка городня, родіола рожева, ряска мала, низка трехраздельная, чистотіл великий, хвощ полевой).

Для лікування екземи застосовують 11 видів (аніс звичайний, бузина чорна, вероніка лікарська, звіробій продірявлений, калина звичайна, лопух, моркву звичайна, медунка лікарська, петрушка городня, фіалка триколірна, хвощ полевой).

Результати таблиці 1 показують, деякі види мають виявляє антимікробну дією, точніше 20 видів (тирлич крестовидная, калина звичайна, крушина ламка, лопух, цибулю ріпчаста, малина звичайна, моркву звичайна, мелиса лікарська, ялівець звичайний, м'ята перцева, обліпиха крушиновидная, кульбаба лікарський, подорожник великий, полин, ряска мала, деревій звичайний, низка трехраздельная, чистотіл великий, шавлія лікарський, хвощ полевой).

Через війну проведеного аналізу слід зазначити, що з усіх зазначених у таблиці критеріям активності, хвощ польовий одна із самих перспективных.

2 Біологічна активність і перспективність деяких таксонов до створення лікарських препаратов.

Проводячи вивчення хвоща польового, нам здалося цікавим визначити чи має він противогрибковым дією, як і нам хотілося дізнатися чи мають настільки ж дією решта видів хвоща (хвощ зимівля, хвощ болотний, хвощ лісової, хвощ луговий) і побачити їх перспективність спрямування створення лікарських препаратов.

Антифунгальная активність екстрактів визначали по максимальному розведенню, у якому зростання грибів був за, ніж у контролі. Як препарата-сравнения використовували нистатин.

Результати досліджень представлені у таблицях 2-6.

Екстракт хвоща полевого

Tаблица 2

| |Trichophyton |Trichophyt.|Candida |Aspergill.|Microsp. | |Экстрагент |mentagroph. |rubrum |albicans|niger |canis | |Вода 100(С |1/15,6 |1/125 |1/1000 |1/500 |1/31,3 | |Етанол 40% |1/250 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 70% |1/1000 |1/7,8 |1/250 |1/1000 |1/1000 | |ХЛФ |1/1000 |1/62,5 |1/125 |1/1000 |1/250 | |Ефір |1/1000 |1/250 |1/500 |1/1000 |1/1000 |

З таблиці 2 видно, що екстракт хвоща польового активний в отнашении таких грибів як Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Aspergillus niger, Microsporum canis, як і видно, що активність вище, коли як экстрагента використовувалася вода.

Екстракт хвоща болотного

Tаблица 3

|Экстрагент |Trichophyton |Trichophyt. |Candida |Asperg. |Microsp. | | |mentagroph. |Rubrum |albicans |niger |canis | |Вода 100(С |1/1000 |1/7,8 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 40% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 70% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |ХЛФ |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Ефір |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |

З таблиці 3 видно, що екстракт хвоща болотного виявляє активність лише до Trichophyton rubrum, причому активний лише водний экстракт.

Екстракт хвоща зимующего

Tаблица 4

| |Trichophyton |Trichophyt. |Candida |Asperg. |Microsp. | |Экстрагент |mentagroph. |rubrum |albicans |niger |canis | |Вода 100(С |1/1000 |1/7.8 |1/1000 |1/250 |1/1000 | |Етанол 40% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 70% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |ХЛФ |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Ефір |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |

Таблиця 4 показує, що хвощ зимівля активний щодо два види грибів: Trichophyton rubrum і Aspergillus niger. Активність виявляє лише водний экстракт.

Екстракт хвоща лугового

Таблиця 5

|Экстрагент |Trichophyton |Trichophyt. |Candida |Asperg. |Microsp. | | |mentagroph. |rubrum |albicans |niger |Canis | |Вода 100(С |1/1000 |1/7,8 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 40% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 70% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |ХЛФ |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Ефір |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |

З таблиці 5 видно, що хвощ луговий має не високої антигрибковой активністю, ефективний лише водний екстракт щодо Trichophyton rubrum.

Екстракт хвоща лесного

Таблиця 6

|Экстрагент |Trichophyton |Trichophyt. |Candida |Asperg. |Microsp. | | |mentagroph. |rubrum |albicans |niger |canis | |Вода |1/1000 |1/1000 |1/250 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 40% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Етанол 70% |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |ХЛФ |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 | |Ефір |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |1/1000 |

За даними таблиці 5 можна дійти невтішного висновку, що хвощ лісової має самої низькою антигрибковой активністю. Активність проявляється в водного вилучення щодо Candida albicans.

Примітка: У разі нашого досвіду за максимальну концентрацію зважали 1000 мкг/мл, оскільки відповідно до літературним даним вищі кількості уявити не можуть інтересу у плані практичного використання растений.

Як очевидно з даних таблиць, усі п'ять видів дослідженого сировини виявили фунгистатическую активність, але у різного рівня. Найбільшу активність виявив екстракт хвоща польового. Ця людина виявилась активним в відношенні всіх п'яти використаних тест-культур. Екстракти хвощів болотного, зимующего і лугового виявилися активними лише у отнашении Tr. rubrum, а екстракт хвоща лісового активний в отнашении Asp. niger.

Фунгистатическая активність змінюється залежно від вибору экстрагента. З таблиць видно, що оптимальною экстрагентом є вода горячая.

Глава IV Вивчення хімічного складу роду хвощ

1 Якісний состав.

1 Виявлення алкалоидов

Проводили спомощью общеосадительных реактивів. Результати представлені в таблицях 7 і 8.

По таблиці 7 видно, що це види досліджуваних хвощів виявили однакову чутливість до реактиву Фреде, стосовно реактиву Драгендорфа найвідчутнішими виявилися хвощ лісової і хвощ зимівля, з реактивом Вагнера найпомітніший результат вийшов щодо хвоща лугового.

Таблиця 7 | |р. Фреде |р. Драген-фа |р. Вагнера | |Хв. польовий |+ + |+ |+ | |Хв. луговий |+ + |+ |+ + | |Хв. лісової |+ + |+ + |- | |Хв. болотний |+ + |+ |+ | |Хв. зимівля |+ + |+ + |+ |

З таблиці 8 видно, що найкращий результат із першого% р-ром фосфорно- вольфрамової кислоти показали хвощі: луговий, польовий і болотний, з розчином фосфорно-молибденовой кислоти - хвош лісової і хвощ зимівля, з розчином кремниево-вольфрамовой кислоти- польовий, луговий і лісової, з розчином пікринової кислоти результати реакцій були б менш значні .

1%-е розчини кислот

Таблиця 8 | |ф-вольфр. |ф-молибд. |кр.-вольфр |пикринов. | | |к-та |к-та |к-та |к-та | |Хв. польовий |+ + + |+ + |+ + |- | |Хв. луговий |+ + + |+ + |+ + |+ | |Хв. лісової |+ |+ + + |+ + |+ | |Хв. болотний |+ + + |+ + |+ |- | |Хв. зимівля |+ |+ + + |+ |- |

Примітка: (-)- відсутність помутніння, осадка;

(+)- слабка опалесценция;

(+ +)- добре помітне помутнение;

(+ + +)- наявність осадка.

З отриманих результатів взаємодії кислого вилучення з трави хвоща польового, лугового, лісового, зимующего і болотного з общеосадительными реактивами на алкалоїди бачимо, що ця група речовин є у досліджуваних объектах.

2 Ідентифікація флавоноидов.

Проба Синоду .

При нагріванні суміші спиртового вилучення трави хвоща польового з соляної кислотою і цинком з'являлося рожеве забарвлення. Така ж забарвлення спостерігалося й у разі хвоща лісового, що свідчить про наявності цієї групи речовин, у досліджуваних об'єктах. Що стосується інших об'єктів (хвощів болотного, лугового, зимующего), видимих змін забарвлення не відбувалося, можливо що у цих об'єктах флавоноїди перебувають у меншому необмеженій кількості й необхідні чутливіші методи їхнього идентификации.

3 Визначення дубильних веществ.

При взаємодії водних витягів всіх п'яти видів досліджуваних хвощів з железоаммонийными квасцами утворилося чорно-зелене забарвлення, а разі хвоща польового і лісного як і виділився осад чорно-зеленого кольору, що на присутність групи конденсованих дубильних речовин. Цей результат підтверджується реакцією взаємодії витягів з 10% оцтової кислотою і десяти% сіллю ацетату свинцю (виникала чорно- зелене окрашивание).

4 Виявлення сапонинов.

Проводили реакцію пенообразования водних витягів досліджуваних об'єктів із гидроксидом натрію і з соляної кислотою, після струшування утворювалася стійка піна завжди, що свідчить про наявності сапонинов тритерпеновой природы.

5 Виявлення алифатических кислот. Дослідження алифатических кислот проводилася і раніше, але ми здалося цікавим перевірити наявність таких кислот як щавлева, бурштинова, яблучна і винна і підтвердити наявність вже відомої лимонної кислоты.

Досліджувався лише водне вилучення хвоща полевого.

Результати представлені у таблиці 9.

Таблиця 9

|Проведенная реакція |Результат | |1.реакция на щавелевую|Осадка не утворилося | |кислоту | | |2.р-ция на бурштинову |Зелена флуоресценція й не народилася | |кислоту | | |3.р-ция на лимонну |при нагріванні з'явилося фіолетове | |кислоту |забарвлення | |4.р-ция на яблучну |під час на хроматогр. папір | |кислоту |крайня зона після поділу | | |флуоресцирует жовто-зеленим кольором | |5.р-ция на винну |утворюється малинове забарвлення, | |кислоту |переходить при нагріванні в вишневе |

Результати таблиці свідчать про наявність в траві хвоща польового лимонної, яблучною і винної кислот.

6 Визначення полисахаридного комплекса.

Для поділу полисахаридного комплексу використовували метод висхідній паперової хроматографії у системі ацетон:бутанол:вода з допомогою сахаров-свидетелей. Після опрацювання хроматограммы анилинфитолатом і нагрівання в сушильній шафі при t( 105(С виявилися плями з Rf=0.27 і Rf=0.24, що він відповідає ксилозе і арабинозе.

7 Визначення мінерального состава.

У результаті проведення рентгено-флуоресцентного аналізу спектрометрі «Спектроскан» сухих залишків хвощів польового, лугового, лісового, зимующего і болотного знайшли такі важкі метали: свинець, цинк, нікель, мідь, кобальт, залізо, марганець, хром.

8 Сесквитерпеновые лактоны

ІК спектри отриманої «смолки» в плівці давали смуги поглинання 1750см- 1, що свідчить про (-лактонной природі виділеної суми веществ.

9 Сполуки кремния

Реакція освіти жовтого і синього кремнемолибденового комплексу з молибдатом амонію у кислому середовищі з допомогою як відновлювача аскорбінової кислоти, підтвердила наявність переважають у всіх досліджуваних видах сполук кремния.

2 Кількісне определение.

1 Визначення змісту флавоноидов

Для вивчення змісту флавоноїдів використовували методику хроматоспектрофотометрического визначення. Дослідження показало,что найбільше флавоноїдів міститься у хвощах польовому і болотному, в інших досліджуваних зразках кількість флавоноїдів кілька ниже.

Результати представлені у таблиці 10

Таблиця 10 |хвощ полевой|хвощ лісової |хвощ |хвощ луговой|хвощ | | | |зимівля | |болотний | |3,37% |1,09% |2,83% |3,2% |3,78% |

2 Визначення змісту кремния

Визначення проводили використовуючи метод фотоколориметрии , результати засвідчили, що відсотковий вміст сполук кремнію в траві хвоща польового становило 1,11%, в траві хвоща лісового- 1,12%, в траві хвоща зимующего 2,12%, в траві лугового і болотного відповідно 1,67% і 2,08%.

4.2.3 Вивчення змісту экстрактивных речовин, у траві хвоща полевого.

Визначення змісту экстрактивных речовин проводили паралельно з дослідженням з вибору экстрагента і часу экстрагирования. Результати дослідження представлені у таблицах.

З поданих даних в таблиці 11 видно, що максимальне кількість экстрактивных речовин, у траві хвоща польового витягається водою очищеної, як холодної і горячей.

Зміст экстрактивных речовин, у траві хвоща польового залежно від экстрагента. (1)

Таблиця 11 |Экстрагент |Вихід, р |% | |Етанол 40% |5,78 |28,92 | |Етанол 70% |5,8 |29,0 | |Етанол 96% |1,8 |9,0 | |Вода 20(С |6,88 |34,4 | |Вода 90-100(С |7,31 |36,55 | |Хлороформ |1,4 |7,0 | |Ацетон |0,15 |2,14 |

Дослідження часу настоювання для виходу экстрактивных речовин показало, що максимальний вихід спостерігається після 16-ти годин настоювання й у наступні годинник змінюється незначно й у межах від 34 до 34,45.

Отримані результати наведені у таблиці 12, як экстрагента використовувалася вода горячая.

Вплив часу настоювання для виходу экстрактивных речовин хвоща полевого.

Таблиця 12 |№ |Час экст-ции, |Вихід, р |Вихід, % | | |годину | | | |1. |12 |5,83 |29,15 | |2. |14 |6,22 |31,1 | |3. |16 |6,86 |34,3 | |4. |18 |6,8 |34 | |5. |20 |6,89 |34,45 |

4.2.4 Виявлення ефірних масел.

Проводили по фармакопейної методиці. Через війну проведеного дослідження ефірну олію виявлено було, тому кількісне визначення не проводили.

4.2.5 Визначення полисахаридного комплекса.

Після фільтрування опадів на воронку Бюхнера, фільтри з опадами висушували і зважували на аналітичних терезах (перед фільтруванням чисті фільтри також зважувалися на аналітичних весах).Результаты представлені в таблиці 13.

Зміст полисахаридных фракцій в траві хвоща полевого.

Таблиця 13

|№ |Фракція |Маса фільтра, |Маса фільтра с|Масса осаду, | | | |р |осадом, р |м | | | | | |в % | |1. |Фр. А |0,2268 |0,4564 |0,2296 |2,1 | |2. |Фр. Б |0,22537 |0,29861 |0,07324|0,62 | |3. |Фр. У |0,22076 |0,4009 |0,18014|1,35 | |Маса загальна | |0,48298|4,07 |

За результатами таблиці 12 слід, що відсотковий вміст комплексу полісахаридів в траві хвоща польового становить близько 4,07%. Значну частина від цього комплексу займають водорозчинні полісахариди, які становлять 2,1% (фр.А), трохи менше міститься полісахаридів гемицеллюлезы і як 1,35% (фр. У), пектинові речовини припадає лише 0,62%.

5 Зміст микроэлементов.

Результати таблиці 14 показують, що у траві хвоща польового більше всього міститься заліза і марганцю, в траві хвоща болотного, лугового і зимующего більше заліза і цинку, в траві хвоща лісового більше марганцю і цинку. Зміст в зразках свинцю, нікелю, міді, кобальту, марганцю (за винятком польового), хрому щодо не высокое.

Таблиця 14 |Хвощі |Pb |Zn |Ni |Cu |Co |Fe |Mn |Cr | |Полєвой |0,82 |11,4 |7,44 |0,34 |1,11 |16,5 |30,39 |1,11 | |Луговий |1,15 |10,2 |2,42 |0,67 |1,43 |8,82 |4,33 |1,43 | |Зимівля |2,78 |26,54|4,67 |2,45 |2,78 |52,8 |7,51 |0,83 | |Лісовий |1,72 |17,5 |2,80 |1,33 |1,72 |13,73|30,1 |0,52 | |Болотний |1,52 |13,6 |1,99 |0,59 |1,52 |56,94|3,21 |1,52 |

Зміст елементів розраховане в миллиграммах на кілограм сухого остатка.

3 Товароведческие показатели.

Проведено товароведческий аналіз трави хвоща польового зібраного на території Томській області у 1996-1998 рр. Аналіз проводився на відповідність з фармакопейної статтею на хвощ польовий (ГФ XI тому 2 ст. 50).Результаты аналізу наведені у таблиці 15.

Результати товароведческого анализа

Таблиця 15

| |Наимен-е |Вимоги до якості по НП |Результати | |№ |показників | |аналізу | | |якості по НП | | | | |Опис |Стебла до 30 див, жорсткі, |Соответству| | | |членисті. Гілки не |ет | | | |розгалужені, косо вгору | | | | |направ-е, піхви | | | | |цилиндр-ие. Колір | | | | |сіро-зелений, запах слабкий, | | | | |смак кислуватий. | | | |Показники | | | |1.|Влажность |трохи більше 13% |7,24% | |2.|Зола загальна |трохи більше 24% |18,37% | |3.|Зола нераств-ая в |трохи більше 12% |8,45% | | |10% HCL | | | |4.|Др. частин раст-й |трохи більше 1% |0,1% | |5.|Др. Видів хвощів |трохи більше 4% |немає | |6.|Орг. домішки |трохи більше 1% |0,15% | |7.|Минер. домішки |трохи більше 0,5% |немає |

Укладання: сировину відповідає вимогам нормативної документации.

Глава V Розробка технологічного процесу набуття сухого экстракта

Характеристика готового продукта:

Екстракт хвоща польового сухий- фармацевтичний препарат застосовуваний у ролі лікарського средства.

Екстракт хвоща польового є комплексом водорозчинних речовин, що з сапонинов, полісахаридів, дубильних речовин, алифатических кислот та інших сполук трави хвоща полевого.

Описание:

Аморфний порошок коричневого кольору, гигроскопичен. У герметично закритою тарі зберігає сипкість, при доступі вологи комкуется.

Своєрідний смак і запах.

Розчинність: розчинний у питній воді, спирте.

Подлинность.

Реакція на кремній. Освіта жовтого і синього кремнемолибденового комплексу з молибдатом амонію у кислому середовищі. Як відновлювача використовували аскорбінову кислоту.

До сухому экстракту додавали 2% розчин хлористоводородной кислоти, додавали 2 мл 10-відсоткового підкисленого розчину молибдата амонію, спостерігали жовте забарвлення, при додаванні кількох кристаликів аскорбінової кислоти розчин ставав интенсивно-синего цвета.

Реакція на сапонины тритерпеновой природы.

До 0,1 р екстракту додати 2 мл води та додати кілька крапель основного ацетату свинцю. З'являється білий осад, підтверджує наявність сапонинов тритерпеновой природы.

Реакція пенообразования (див выше).

Хранение:

У сухому захищеному від світла місці при темпиратуре не вище 20(С.

Технологічна схема производства.

ТП 1. Одержання вихідного извлечения.

1 Здрібнення трави хвоща полевого.

(

1.2Удаление пыли.

(

3 Екстракція сырья.

(

4 Відстоювання извлечения.

(

4 Фільтрація извлечения.

(

ТП 2. Одержання готового продукта.

1 Упаривание извлечения.

(

2 Сушіння извлечения.

(

3 Здрібнення готового продукта.

(

4 Фасування й готової продукции.

Проміжні продукти. Сировину. Материалы.

Основною сировиною щоб одержати екстракту хвоща польового сухого на стадії ТП-1 є здрібнення до частинок розміром 7мм трави хвоща польового, визволення з пилу (частинок менш 0,25мм). Вологість трохи більше 13%, золи загальної трохи більше 24%.

Як экстрагента використовувалася вода очищена за нормальної температури 100(С на час подання на сырье.

На стадії ТП-2. Отримуємо готовий продукт-комплекс водорозчинних речовин, состоящи з: сапонинов, дубильних речовин, полісахаридів, алифатических кислот та інших соединений.

Вимоги до якості що застосовуються у виробництві сировини й материалов.

Таблиця 16

|№ |наимен-е сировини|№ ГОСТ или|Квалифи|Сорт |% сод-я осн. | | |і матеріалів |ТУ |кация |чи |речовини | | | | | |артикул| | |1. |Трава хвоща |ФС № 50 |( |( |% | | |польового | | | | | |2. |Вода очищенная|ФС № 42 ГФ|( |( |100% | | | |Xl | | | |

Специфікація устаткування, контрольно-аналитических і регулюючих приборов.

Таблиця 17

|№ |наимен-е оборуд. |кол|Материал рабочей|Характеристика | | |виміряє. і регул. |-во|части |устаткування | | |Приладів | |устаткування |контрольно-измер| | | | | |іт. приладів | |1 |Фільтр |4 |скло |ємністю 1 л з | | |лабораторний | | |краном |

|2 |Измельчитель типу |1 |нерж. сталь | | | |траворезки | | | | |3 |Сито 7 мм |1 |цв. метал |діаметр | | | | | |отворів 7 мм | |4 |Сито 0,25 мм |1 |цв. метал |діаметр | | | | | |отворів 0,25 | | | | | |мм | |5 |Мірний циліндр |1 |скло |ємність 0,5 л | |6 |Терези тарирные |1 |метал |гранична | | | | | |навантаження 1 кг | |7 |Колба збірник |4 |скло |ємність 300мл | |9 |Сикатив шафу |1 |нерж. сталь | | |10 |Ступка з маточкою |1 |порцеляна | | |11 |Терези аналітичні ВЛР|1 |нерж. сталь |гранична | | |200 | | |навантаження 200,0 | |12 |Вирва скляна |1 |стело | | |13 |Выпарительная чашка |1 |порцеляна | |

Переказ технологічного процесса.

ТП-1 Одержання вихідного извлечения.

1 Здрібнення трави хвоща полевого.

2 Видалення пыли.

60,0 р подрібненої трави з допомогою сита зі стороною отвори 0,25мм звільняють від пилу (частинок менш 0,25 мм).

3 Екстракція сырья.

Екстракцію ведуть методом ремацерации. 20,0 подрібненої і звільненій від пилу трави хвоща польового вміщують у фільтр і заливаємо 260 мл очищеної води t(=80-100(С. Экстрагент подають знизу безперервним потоком під тиском до «дзеркала». Потім залишають на 8 годин для настоювання, після настоювання з перколятора зливають 88 мл извлечения.

У фільтр знову подають знизу безперервним потоком під тиском киплячу очищену воду 92 мл і вони залишають на 8 годин. Після 8 годин з перколятора зливають 96 млизвлечения. Сировину з перколятора вивантажують і віджимають на пресі. Отжим становить 20 мл.

Вилучення і отжим об'єднують їх і отримують 204мл, що відстоюють при температурі 3-5(С і проціджують через три шару марли.

Примітка: для імітації «паровий сорочки» фільтр покривали тканиною (зменшення теплоотдачи).

Технологічний процес повторювали 4 раза

Кількість витрачених і збереження одержаних речовин на стадії ТП-1.

Таблиця 18

|№ |наимен-е |сод-е |завантажене (отримано) | | |проміжних |оснавных |щодо маси за обсягом | | |продуктів, відходів |речовин | | | |сировини | | | | |Завантажене | |1 |Трава хвоща польового | |20,0 | | |2 |Вода очищена |100% |352,0 |352,0 | | |Отримано | |3 |Вилучення | | |204,0 | | |Відходи | |4 |Шрот | |27,12 | |

ТП-2 Одержання готового продукта.

1 Упаривание вилучення й сушка

Отримане вилучення сушать на электровентиляторе «Орбіта» при температурі 30-40(С (метод конвективного сушіння) до вологості не более10%.

2.2 Здрібнення готового продукта

Готовий продукт подрібнюють в ступці і взвешивают.

Готовий продукт є аморфний порошок коричневого кольору, своєрідного смаку і запаху, розчинний в воде.

Гигроскопичен, при доступі вологи комкуется.

4 Фасування й готового продукта

Готовий продукт- екстракт хвоща польового сухий вміщують у широкогорлый флакон з навинчивающейся кришкою. Наклеюють этикетку.

Контроль производства.

Аналіз вихідного сырья.

Реакція на кремній. Освіта жовтого і синього кремнемолибденового комплексу з молибдатом амонію у кислому середовищі. Як відновлювача використовували аскорбінову кислоту.

До сухому экстракту додавали 2% розчин хлористоводородной кислоти, додавали 2 мл 10-відсоткового підкисленого розчину молибдата амонію, спостерігали жовте забарвлення, при додаванні кількох кристаликів аскорбінової кислоти розчин ставав интенсивно-синего цвета.

Реакція на сапонины тритерпеновой природы.

До 0,1 р екстракту додати 2 мл води та додати кілька крапель основного ацетату свинцю. З'являється білий осад, підтверджує наявність сапонинов тритерпеновой природы.

Реакція пенообразования

Аналіз готового продукта.

Втрата у своїй при висушуванні екстракту мусить бути трохи більше 5%, золи загальної трохи більше 10%.

Втрата у своїй при висушуванні становила 3,75%, зола загальна- 7,2%

Зміст вологи в препараті і золи загальної визначають за методикою ГФ XI издания.

Якісні реакцію кремній і сапонины вказані выше.

Техніка безопасности.

При організації виробництва екстракту хвоща польового сухого слід керуватися правилами що у книгах «Техніка безпеки і виробнича санітарія у хімічній промисловості» видавництво «Хімія» М., 1965 і «Охорона праці та техніки безпеки у хімічній промисловості», видавництво «Хімія», М., 1974.

Щоб не допустити пожеж та ліквідації наслідків може бути передбачено пожежний водогін. У виробничих та підсобних приміщеннях необхідно встановити пінні вогнегасники, ящик з піском, відра та інші кошти огнетушения відповідно до нормами Н-102-54 у разі пожежі може бути складено план эвакуации.

Усі електрообладнання має бути заземлено, яке тип повинен відповідати класифікації приміщення по небезпеки поразки електричним струмом. Для ламп місцевого висвітлення необхідно використовувати напруга 36В в сухих і вище 12В в сирих помещениях.

До обслуговування технологічного устаткування повинні допускатися особи, минулі інструктаж технічно безпеки, і навіть перевірені знань кваліфікаційної комиссией.

Перелік виробничих инструкций.

Правильне ведення технологічного процесу, дотримання правил, по охорони праці й лазерній техніці безпеки регламентується такими инструкциями:

1.Технологические инструкции.

1 Технологічна інструкція по подрібненню рослинного сырья.

2 Технологічна інструкція із виробництва екстракту хвоща польового сухого.

3 Технологічна інструкція з розфасовки, упаковці і оформленню готової продукции.

2. Інструкції технічно безпеки, пожежної безпеки та виробничої санитарии.

1 Інструкція про заходи пожежної безпеки в виробничих помещениях.

2 Інструкція по электробезопасности.

3 Інструкція захисту від статичного электричества.

4 Інструкція санітарного контролю та змісту виробничих та побутових помещений.

3. Інструкції по експлуатації приборов.

Техніко-економічні нормативы.

Рослинним сировиною для екстракту хвоща польового сухого є трава хвоща польового (ФС №50 ГФ ХI вид т. 2)

Як сировину щоб одержати проміжних кінцевих продуктів використовують воду очищену (ФС № 42 2619-97, ГФ ХI изд).

ВЫВОДЫ

1. Проведено аналіз 44 видів лікарських рослин, які ростуть біля Сибіру та виявлено перспективність хвоща польового до застосування в дерматокосметологии (з літературних данным).

2. Проведено мікробіологічний скринінг рослин роду хвощ на біологічну активність (хвощ польовий, хвощ луговий, хвощ зимівля, хвощ болотний і хвощ лісової). У цьому встановлено, що з вибраних видів найкращою противогрибковой активністю щодо збудників дерматофитий має хвощ полевой.

3. Проведено порівняльне вивчення складу БАВ в сировину хвоща польового, лугового, лісового, зимующего і болотного і виявлено: алифатические кислоти (цитринова, винна, яблучна), полісахариди (арабиноза і ксилоза), флавоноїди, сесквитерпеновые лактоны, алкалоїди, таниды, сапонины і мікроелементи (цинк, хром, марганець, залізо, свинець, мідь, кобальт). У тому числі вперше идентифицированны цукру (арабиноза і ксилоза), мікроелементи, алифатические кислоты(яблочная і винна), сесквитерпеновые лактоны.

4. Встановлено кількісний вміст флавоноїдів, полісахаридів, сполук кремнію, микроэлементов.

5. Розроблено технологічна схему одержання сухого екстракту хвоща полевого.

ЛІТЕРАТУРНИЙ ОБЗОР

1. Атлас лікарських рослин СРСР.- М.: Госмедиздат, 1962-704 с.

2. Атлас ареалів і інтелектуальних ресурсів лікарських рослин СССР.-М.: госмедиздат. 1962.-704 с.

3. Ботанико-фармацевтический словник/ Під ред. К.Ф. Блиновой і Г.П.

Яковлева-М.: Вищу школу, 1990-272 с.

4. Вичканова С.А., Рубінчик М.А. Методика пошуки антимікробних препаратів та вищих рослин -Київ, 1967-138 с.

5. Воронков М.Г., Кузнєцов І.Г. Кремній на живу природі- Новосибірськ: наука. 1984- 157 с.

6. Воронков М.Г., Зельчан Г.Н. Кремній і жизнь.-Рига: Знання. 1978.-588 с.

7. Гаммерман А.Ф. Курс фармакогнозии.-Л.: Медицина 1967.-690 с.

8. Гринкевич Н.І., Сафронич Л.А. Хімічний аналіз лікарських растений

9. Гришина Л.Л., Самойлова О.М. Облік біомаси і хімічний аналіз рослин. М.: 1971-118 с.

10. Губанов І.А. лікарська флора Далекого Востока-М.: Медицина 328с.

11. Гаммерман А.Ф., Грім І.І. Дикорастушие лікарські рослини СССР.-

М.: Медицина, 1976-286 с.

12. Державна фармакопея СРСР. Дев'яте издание.-М.: Медицина,1961.-

911с.

13. Державна фармакопея. Одинадцяте видання.- М.: Медицина.1987.-

Т.1.-336с.

14. Державна фармакопея. Одинадцяте видання. - М.:

Медицина.1987.-Т.2.-400с.

15. Дмитрук С.І. Дисертаційна работа

16. Боргів Б.М. Хімія кремнійорганічних сполук. - Л.:1988 184 с.

17. Задорожний А.М., Соколов С.Я. Довідник по лікарським растениям.

- М.: Лісова промышленность,1988-415 с.

18. Звєрєва А.В.Действие польового хвоща і брунькового чаю виділення свинцю і ртуті у кроликів // Праці Хабаровського медичного института-Сб.18.-1959.-103-109 с.

19. Ковальова Н.Г. Лікування растениями.-М.: 1971.-351с

20. Корсун В.Ф., Ситкевич А.Є., Єфімов В.В. Лікування препаратами рослинного рпроисхождения.- Білорусь, Минск-1995, 383с.

21. Лікарські рослини середньої смуги європейській частині России.-

М.:Планета, 1992.-187 с.

22. Машковский М.Д. Лікарські кошти. М. 1985-Т.1.-624 с.

23. Михайлов У. Сучасні фитотерапевтические препараты,

(справочник).М., стар Ко,1997-144с.

24. Муравйов Д.А. Фармакогнозія. М., Медицина ,1991-560 с.

25. Попов О.П. лікарські рослини у народній медицине.-Киев, 1967.-

315с.

26. Родіонов О.Н. Грибкові заболеваниякожи.-С.-П.:Питер 1998.-281с.

27. Скляревский Л. Н., Губанов І.А. Лікарські рослини в быту.-

М.:Росагропромиздат.-1989-272 с.

28. Соколов С.Я., Замотаев І.П. Довідник по лікарським растениям.

М.: Медицина. 1998- 463с.

29. Решетникова М.Д. Фармакогностическое вивчення хвоща польового .

Дисертаційна робота , Перм 1993- 117с.

30. Шретер А.І. Лікарська флора Далекого Сходу. М.: Медицина.1977-

328с.

Головна:Фармакогностическое вивчення роду хвощ